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原理：活細胞和未染色的生物標本，因細胞各部細微結(jié)構(gòu)的折射率和厚度的不同，光波通過時，波長和振幅并不發(fā)生變化，僅相位發(fā)生變化（振幅差），這種振幅差人眼無法觀察。而相差顯微鏡通過改變這種相位差，并利用光的衍射和干涉現(xiàn)象，把相差變?yōu)檎穹顏碛^察活細胞和未染色的標本。

相差顯微鏡和普通顯微鏡的區(qū)別是：用環(huán)狀光闌代替可變光闌， 用帶相板的物鏡代替普通物鏡，并帶有一個合軸用的望遠鏡。相差顯微鏡一般都具有明場顯微鏡的功能。

測試一：通過圖片來對比相差和明場，樣品呈現(xiàn)出的不同效果，樣品由廣西民族大學某實驗室提供。（設(shè)備：奧林巴斯CKX41；相機：廣州明美顯微成像系統(tǒng)MC25；樣品：培養(yǎng)瓶內(nèi)的細胞）

使用10倍的明場物鏡，細胞的形態(tài)并不清晰

使用10倍的相差聚光鏡和物鏡，細胞以浮雕感的形態(tài)清晰地呈現(xiàn)

所以：需要做細胞培養(yǎng)的科學實驗，相差顯微鏡是必不可少的基礎(chǔ)工具。

測試二，使用平場物鏡和相差物鏡拍攝熒光染色細胞，圖像有何區(qū)別： （設(shè)備：奧林巴斯CKX41；相機：廣州明美顯微成像系統(tǒng)MC25；樣品：培養(yǎng)瓶內(nèi)的細胞）

使用10倍平場物鏡的細胞熒光染色圖片

使用10倍相差物鏡拍攝的細胞熒光圖片

可以得出：使用平場物鏡拍攝熒光圖片亮度更亮。原因是相差物鏡內(nèi)含有相差環(huán)，會阻擋部分光線。建議在拍弱熒光時，務必使用平場物鏡。