熒光圖像的記錄方法
【明美光電】一般染色之標(biāo)本，應(yīng)立即觀察，因當(dāng)時(shí)熒光最顯著；若不能馬上觀察，須儲(chǔ)存于干燥盒(Polyethylene Bag) 內(nèi)，有時(shí)在0～5℃ 儲(chǔ)存，可保存一個(gè)月左右，仍可呈現(xiàn)特異熒光。
在熒光顯微鏡之紫外線照射下，染出之特異性熒光會(huì)很快消失，故要照相存證者，須于材料新鮮時(shí)染色，并馬上照相，才會(huì)有好效果。若使用自動(dòng)相機(jī)拍照，則底片以Kodacolo r(ASA 100) film 為宜，儀器則設(shè)定為ASA 400，照完后送洗時(shí)應(yīng)指定以ASA 400 沖洗。以此相片再使用適當(dāng)之正片底片(Kodak#5072) 照相，此時(shí)應(yīng)改變不同曝光時(shí)間的長短而選最好的片子。
熒光顯微鏡所看到的熒光圖像,一是具有形態(tài)學(xué)特征,二是具有熒光的顏色和亮度,在判斷結(jié)果時(shí),必須將二者結(jié)合起來綜合判斷。結(jié)果記錄根據(jù)主觀指標(biāo),即憑工作者目力觀察。
作為一般定性觀察,基本上可靠的。隨著技術(shù)科學(xué)的發(fā)展,在不同程度上采用客觀指標(biāo)記錄判斷結(jié)果,如用細(xì)胞分光光度計(jì),圖像分析儀等儀器。但這些儀器記錄的結(jié)果,也必須結(jié)合主觀的判斷。
熒光顯微鏡攝影技術(shù)對于記錄熒光圖像十分必要,由于熒光很易褪色減弱,要即時(shí)攝影記錄結(jié)果。方法與普通顯微攝影技術(shù)基本相同。只是需要采用高速感光膠片如ASA200以上或24以上。因紫外光對熒光猝滅作用大,如FITC的標(biāo)記物,在紫外光下照射30s,熒光亮度降低50%。所以,曝光速度太慢,就不能將熒光圖像拍攝下來。
一般研究型熒光顯微鏡都有半自動(dòng)或全自動(dòng)顯微攝影系統(tǒng)裝置CCD顯微鏡攝像頭或CMOS顯微鏡攝像頭。
添加日期：2013-03-18
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